主要技术指标

流式细胞分选仪的主要技术指标如下： 1. **光学系统相关指标**： - **激光器配置**：激光器的类型、数量和波长决定了仪器可激发的荧光染料种类以及检测的荧光参数。常见的激光器波长有 405nm、488nm、561nm、633nm 等，多激光配置可实现多色荧光分析。例如，一些高端的流式细胞分选仪可能配备 3 根或 5 根不同波长的激光器，能够同时检测十几种甚至更多颜色的荧光信号。 - **荧光检测灵敏度**：指仪器能够检测到的单个细胞上的最低荧光信号强度。灵敏度越高，越能检测到低表达量的生物分子。一般用 MESF（分子等效可溶性荧光素）等单位来表示，优秀的流式细胞分选仪荧光检测灵敏度可达到小于 85 MESF 等水平。 - **分辨率**：反映仪器区分不同细胞群体或检测参数差异的能力，通常用变异系数（CV 值）来表示。CV 值越小，分辨率越高，仪器对细胞特征的区分能力越强。一般流式细胞分选仪的 CV 值应小于 2.0%。 2. **分选性能指标**： - **分选速度**：指仪器在单位时间内能够分选的细胞数量，是衡量流式细胞分选仪工作效率的重要指标。分选速度越快，越能在短时间内处理大量的细胞样本。一般分选速度可达到每秒几千个至数万个细胞，先进的仪器分选速度可达 70,000 个细胞/秒以上。 - **分选纯度**：指分选后得到的目标细胞群体中，目标细胞所占的比例。高纯度的分选对于后续的细胞研究和应用非常重要，通常分选纯度要求在 98%以上，一些高性能的仪器分选纯度可达到 99%以上。 - **分选得率**：即分选后实际获得的目标细胞数量与原始样本中目标细胞数量的比值。分选得率越高，说明仪器对目标细胞的回收能力越强，通常要求分选得率在 80%以上。 - **分选模式和通道数**：分选模式包括二路分选（将细胞分为两类）和多路分选（可将细胞分为多个类别）。通道数决定了仪器同时分选的细胞种类或亚群的数量，例如四路分选可以同时将细胞分为四个不同的群体。 3. **分析性能指标**： - **分析速度**：指仪器每秒能够分析的细胞数量，分析速度快可以在较短时间内获取大量细胞的信息。一般流式细胞仪的分析速度在每秒几千个至数万个细胞不等，高端仪器的分析速度可达到 100,000 细胞/秒及以上。 - **检测细胞大小范围**：仪器能够检测的细胞大小的范围，通常为 0.2μm - 50μm 或更宽的范围，以适应不同类型细胞的检测需求。 4. **其他指标**： - **液滴延迟的准确性**：液滴延迟是指从细胞被激光检测到液滴形成并充电，再到液滴在电场中偏转的时间间隔。液滴延迟的准确性直接影响分选的准确性和纯度，优秀的流式细胞分选仪应具备自动实时调整监测液滴时间延迟的功能。 - **仪器的稳定性和重复性**：指仪器在长时间运行过程中以及不同批次样本检测中的性能稳定性和结果重复性。稳定性和重复性好的仪器可以保证实验结果的可靠性和可重复性。 - **样本兼容性**：包括可处理的样本类型（如细胞悬液、组织匀浆等）、样本浓度范围、样本体积等方面的要求。仪器应能够适应不同类型和浓度的样本，以便满足各种实验需求。

主要功能/应用范围

利用压力驱动的液流系统和电子处理系统，实现每秒分选数万个细胞

服务内容

1. **实验咨询与方案设计**： - **专业建议**：根据客户的研究目的和样本特点，为客户提供关于实验设计、细胞标志物选择、荧光染料搭配等方面的专业建议，帮助客户制定合理的实验方案。例如，如果客户想要分选免疫细胞亚群，服务人员会根据不同亚群的特异性标志物，建议合适的抗体组合和荧光染料。 - **可行性评估**：对客户提出的实验想法进行可行性评估，包括样本的适用性、实验条件的合理性等，避免客户在实验过程中遇到不必要的困难和错误。 2. **样本处理**： - **单细胞悬液制备**：将客户提供的组织样本、血液样本等制备成适合流式细胞分选的单细胞悬液。这包括组织的消化、细胞的分散、去除杂质和细胞团块等操作，以确保细胞能够在流式细胞仪中单个通过并被准确检测和分选。例如，对于组织样本，需要使用合适的酶进行消化，将组织分解成单个细胞；对于血液样本，需要进行红细胞裂解等处理，去除红细胞的干扰。 - **样本保存与运输指导**：如果客户需要将样本运输到服务机构进行检测或分选，提供样本保存和运输的指导，确保样本的质量和活性在运输过程中不受影响。例如，告知客户合适的保存温度、保存时间以及运输方式等。 3. **细胞染色**： - **染料选择与配置**：根据实验需求，选择合适的荧光染料，并配置成适当的染色液。不同的细胞标志物需要搭配不同的荧光染料，以确保能够准确地检测和分选目标细胞。例如，对于细胞膜表面标志物的检测，常用的荧光染料有FITC、PE等；对于细胞核内标志物的检测，常用的荧光染料有DAPI、PI等。 - **染色操作**：按照标准的操作流程对单细胞悬液进行染色，确保染色的均匀性和稳定性。染色过程中需要控制好染色时间、温度、染料浓度等因素，以保证染色效果。同时，还需要设置对照实验，以验证染色的特异性和准确性。 4. **仪器调试与参数设置**： - **仪器校准**：定期对流式细胞分选仪进行校准，确保仪器的性能和检测结果的准确性。校准包括光路校准、液流校准、荧光强度校准等方面，以保证仪器的各项参数处于最佳状态。 - **参数设置**：根据实验方案和样本特点，设置合适的仪器参数，如激光功率、荧光检测器的灵敏度、分选阈值等。这些参数的设置直接影响到细胞的检测和分选效果，需要根据实际情况进行优化和调整。 5. **细胞分选**： - **分选操作**：使用流式细胞分选仪对染色后的单细胞悬液进行分选，将目标细胞从混合细胞群体中分离出来。分选过程中需要严格控制分选条件，确保分选的纯度和回收率。例如，可以根据细胞的大小、形态、荧光强度等特征进行分选。 - **分选模式选择**：根据客户的需求，选择不同的分选模式，如单克隆分选、群体分选、特定细胞类型分选等。同时，还可以根据客户的要求，将分选后的细胞收集到不同的容器中，如离心管、培养板、微孔板等。 6. **分选后细胞处理与分析**： - **细胞培养**：如果客户需要对分选后的细胞进行培养，提供细胞培养的服务，包括培养基的选择、培养条件的设置、细胞的传代培养等。确保分选后的细胞能够在合适的环境中生长和繁殖。 - **细胞分析**：对分选后的细胞进行进一步的分析，如细胞活性检测、细胞功能检测、基因表达分析等。这些分析可以帮助客户了解分选后细胞的生物学特性和功能状态，为后续的研究提供数据支持。 7. **数据处理与报告生成**：

服务的典型成果

流式细胞分选仪的服务典型成果包括以下几方面： 1. **医学研究领域**： - **免疫相关研究**： - 辅助研究人员对免疫细胞亚群进行精确分析和分选，比如在T细胞研究中，通过流式细胞分选仪区分出不同功能的T细胞亚群，如辅助性T细胞、细胞毒性T细胞、调节性T细胞等，研究它们在免疫应答、免疫调节以及疾病发生发展中的作用。例如，浙江大学医学院公共技术平台曾助力夏梦/王青青团队的研究，通过流式细胞分选仪分选CD4+T细胞不同亚群，为探索低精氨酸条件对T细胞表型和功能的影响提供了有力支持。 - 对于免疫疾病的发病机制研究，流式细胞分选仪可以帮助分选特定的免疫细胞，分析其表面标志物和细胞内信号分子的变化，从而揭示疾病的免疫病理机制。比如在自身免疫性疾病中，研究人员利用流式细胞分选技术分析患者免疫细胞的异常变化，为疾病的诊断和治疗提供理论依据。 - **血液系统疾病研究**：在白血病、淋巴瘤等血液系统疾病的诊断和分型中发挥重要作用。通过对患者骨髓或血液样本中的细胞进行流式细胞分析和分选，可以确定肿瘤细胞的免疫表型特征，为疾病的准确诊断、预后评估以及治疗方案的制定提供依据。例如，根据白血病细胞表面的特定抗原表达情况，将白血病分为不同的亚型，以便采取针对性的治疗措施。 - **肿瘤研究**： - 可以分选肿瘤干细胞。肿瘤干细胞是肿瘤组织中具有自我更新和分化能力的细胞亚群，与肿瘤的发生、发展、复发和转移密切相关。流式细胞分选仪能够根据肿瘤干细胞的表面标志物，从肿瘤细胞群体中分离出肿瘤干细胞，为研究肿瘤干细胞的生物学特性、寻找新的治疗靶点提供了技术手段。 - 分析肿瘤细胞的免疫逃逸机制。通过检测肿瘤细胞表面的免疫检查点分子以及与免疫细胞相互作用的分子，研究肿瘤细胞如何逃避机体的免疫监视，为开发新的免疫治疗方法提供思路。 2. **生物学基础研究领域**： - **细胞周期和凋亡研究**：利用流式细胞分选仪可以对处于不同细胞周期阶段的细胞进行分选和分析。例如，通过对细胞DNA含量的检测，将细胞分为G0/G1期、S期和G2/M期，研究细胞周期的调控机制。同时，还可以通过检测细胞凋亡过程中细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸外翻等特征，分选凋亡细胞，研究细胞凋亡的信号通路和调控因素。 - **干细胞研究**：在干细胞的研究中，流式细胞分选仪是必不可少的工具。可以根据干细胞的表面标志物，从组织或细胞群体中分离出干细胞，并对其进行纯化和扩增。例如，从骨髓、脐带血等组织中分选造血干细胞，用于血液系统疾病的治疗研究；从胚胎或成体组织中分选间充质干细胞，研究其多向分化潜能和在组织修复中的作用。 - **基因表达和蛋白质功能研究**：结合荧光标记技术，流式细胞分选仪可以用于分选表达特定基因或蛋白质的细胞。通过对这些细胞的进一步分析，可以研究基因的表达调控机制以及蛋白质的功能。例如，利用荧光报告基因系统，分选表达特定基因的细胞，研究该基因在细胞中的作用；或者分选表达特定蛋白质的细胞，研究该蛋白质在细胞信号转导、代谢等过程中的功能。 3. **药物研发领域**： - **药物筛选**：在药物研发的早期阶段，流式细胞分选仪可以用于筛选对细胞具有特定作用的药物。例如，通过检测药物处理后细胞的凋亡、周期阻滞、表面标志物变化等指标，快速筛选出具有潜在治疗效果的药物。

对外开放共享规定

开放对象：大型仪器应向全社会开放，包括其他高校、科研院所、企业、社会研发组织以及个人等。 开放内容与方式： 管理单位应公布大型仪器的目录、开放共享管理制度、服务方式、服务内容、服务流程、收费标准等信息，实时提供在线服务。 免税进口的仪器设备在符合监管条件的前提下，准予用于其他单位的科学研究、科技开发和教学活动。 收费标准：管理单位提供开放共享服务可按照成本补偿和非盈利原则收取费用，并公开收费标准。 合同与知识产权：管理单位提供开放共享服务时，应与用户订立合同，明确服务内容、知识产权归属、保密要求、损害赔偿、违约责任等事项。开放对象：大型仪器应向全社会开放，包括其他高校、科研院所、企业、社会研发组织以及个人等。 开放内容与方式： 管理单位应公布大型仪器的目录、开放共享管理制度、服务方式、服务内容、服务流程、收费标准等信息，实时提供在线服务。 免税进口的仪器设备在符合监管条件的前提下，准予用于其他单位的科学研究、科技开发和教学活动。 收费标准：管理单位提供开放共享服务可按照成本补偿和非盈利原则收取费用，并公开收费标准。 合同与知识产权：管理单位提供开放共享服务时，应与用户订立合同，明确服务内容、知识产权归属、保密要求、损害赔偿、违约责任等事项。

参考收费标准

请联系河北省胸科医院科教处。